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如何溶解59859cc威尼斯官网地址?

发布日期:2023-02-15 作者:59859cc威尼斯官网地址 点击:

59859cc威尼斯官网地址的溶解性很大程度上取决于59859cc威尼斯官网地址的极性。酸性的蛋白溶解于碱性溶液,而碱性蛋白可溶解于酸性溶液,含有大量不带电荷的极性氨基酸残基或疏水性氨基酸的疏水性59859cc威尼斯官网地址和中性59859cc威尼斯官网地址可先溶解于少量有机溶剂中,如DMSO、DMF、醋酸、乙腈、甲醇、丙醇或异丙醇,然后加水(蒸馏水)稀释。含有甲硫氨酸或半胱氨酸的59859cc威尼斯官网地址不能用DMSO溶解,因为DMSO可能造成侧链氧化。

59859cc威尼斯官网地址溶解测试:在59859cc威尼斯官网地址溶解之前先取小部分进行59859cc威尼斯官网地址溶解测试,您需要测试几种不同的溶剂,直到找到适当的一种。超声处理有助于打碎颗粒并增加溶解度。(注意: 超声处理会引起溶液发热和59859cc威尼斯官网地址降解。)

将每个酸性氨基酸赋值为-1,包括天冬氨酸(D)、谷氨酸(E)、以及羧基末端-COOH。每个碱性氨基酸赋值为+1,包括精氨酸(R)、赖氨酸(K)、组氨酸(H)以及氨基末端-NH2。然后计算整个59859cc威尼斯官网地址的电荷数。

十二烷基硫酸钠

如果整段肽所带电荷是阳性的,说明该肽是碱性的。可先尝试用蒸馏水来溶解;如果不溶于水,接着尝试用少量10%-25%醋酸溶解,如果仍然失败的话,添加一些TFA(10-50微升)来增溶,然后用水稀释至理想浓度。

如果整段肽所带电荷是阴性的,说明该肽是酸性的。酸性的59859cc威尼斯官网地址可以尝试用PBS(PH 7.4)来溶解,如果不溶的话,添加少量的碱性溶剂,如0.1 M的碳酸氢铵,然后加水稀释至理想浓度。含有游离半胱氨酸的59859cc威尼斯官网地址应溶于脱气的酸性缓冲液中,因为当PH值大于7时,巯基会被迅速氧化成二硫化物。

如果整段肽电荷是零,说明肽是中性的。中性肽通常溶于有机溶剂。首先,尝试添加少量乙腈、甲醇或异丙醇。对于高度疏水的59859cc威尼斯官网地址,可使用少量的二甲基亚砜溶解,然后用水稀释至理想浓度。对于含有自由半胱氨酸的肽,需使用DMF而不是DMSO。对于有聚集倾向的肽,可添加6M盐酸胍或8M尿素,然后进行必要的稀释。

为了防止或尽量减少59859cc威尼斯官网地址降解,请将59859cc威尼斯官网地址以冻干粉形式保存在-20°C,-80°C更佳。如果需要保存溶液肽,分成小样存放,以避免反复冻融。一份样品融冻后未用完,应扔掉。细菌降解有时会成为溶液肽的麻烦,所以请将肽溶于无菌水或肽溶液过滤除菌。

碱性氨基酸: K, R, H, N-terminus

酸性氨基酸: D, E, C-terminus

极性中性氨基酸: F, I, L, M, V, W, Y

非极性疏水氨基酸: G, A, S, T, C, N, Q, P, 乙酰基,酰胺基

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